
Western Blot全流程優化:伯樂預制膠與成像系統提升蛋白檢測效能
內容簡介:
本文全面審視了Western Blot(WB)技術的全流程,并詳細介紹了伯樂(Bio-Rad)如何通過其創新產品解決該傳統技術中的痛點。文章重點評價了Criterion™和Mini-PROTEAN®系列預制膠的均一性與便捷性,介紹了Trans-Blot® Turbo™轉印系統的高速高效轉印技術,并深入分析了ChemiDoc™ MP等化學發光/熒光成像系統的定量成像能力。旨在為從事蛋白質表達分析的研究人員提供一套標準化、可重復且高效的WB整體解決方案,提升數據質量與科研效率。
關鍵詞: Western Blot、預制膠、轉印系統、化學發光成像、定量蛋白質分析
正文:
Western Blot(蛋白質免疫印跡)作為檢測特定蛋白質表達、分子量大小和翻譯后修飾的經典技術,至今仍是分子生物學、細胞生物學和生物醫學實驗室常規手段。然而,傳統的WB操作流程繁瑣、耗時且變量多,結果的可重復性和定量準確性常常面臨挑戰。伯樂(Bio-Rad)針對WB的每一步驟——從電泳、轉膜到檢測成像——都提供了經過優化的產品和技術,旨在實現WB流程的標準化、自動化和精準定量。
1. 電泳:預制膠的均一性革命
凝膠電泳是WB的第一步,其質量直接影響后續結果。手工配制聚丙烯酰胺凝膠(SDS-PAGE)存在批次間差異大、孔道易變形、重復性差等問題。伯樂的Criterion™和Mini-PROTEAN®系列預制膠解決了這一痛點。這些預制膠在嚴格控制的條件下工業化生產,確保了的批間一致性和孔道均一性。研究者只需撕開包裝,加入緩沖液和樣品即可上樣電泳,省時省力,并極大地減少了人為誤差和有毒單體丙烯酰胺的接觸風險。Criterion™系統更兼容26-well和18-well兩種規格的膠板,通量靈活,非常適合進行多樣本間的平行比較。
2. 轉?。簭摹斑^夜慢轉"到“7分鐘快轉"
將蛋白質從凝膠轉移至膜上(轉?。┦荳B的瓶頸步驟。傳統的濕轉法通常需要低電流條件下轉印數小時甚至過夜,效率低下。伯樂的Trans-Blot® Turbo™轉印系統采用了創新技術,通過優化緩沖液、電場和轉印膜材料,實現了高效、快速的轉印。它可以在7-10分鐘內完成標準尺寸凝膠的轉印過程,且轉印效率更高,尤其對大分子量蛋白的轉移優于傳統方法。該系統大大縮短了WB的實驗周期,并減少了蛋白在長時間轉印中的擴散和損失。
3. 檢測與成像:進入精準定量時代
傳統的WB檢測依賴于在暗室中壓X光片,這種方法動態范圍窄、定量不準確且操作不便。伯樂的ChemiDoc™ MP成像系統代表了WB檢測的現代化演進。它是一款多功能成像儀,支持化學發光、熒光、比色法及染色應用。
化學發光檢測: 其高靈敏度CCD相機和自動曝光功能能夠捕獲強度跨越數個數量級的信號,動態范圍遠超X光片,并可生成可用于定量的數字圖像文件。
熒光Western Blot: ChemiDoc MP系統支持IRDye®等近紅外熒光二抗。熒光WB無需底物孵育步驟,避免了酶反應動力學帶來的非線性問題,線性動態范圍更寬,允許多個目標蛋白在同一張膜上同時進行檢測(多重免疫檢測),并進行更精確的定量。伯樂也提供相應的熒光標記分子量標準和熒光總蛋白定量預染Marker,為標準化定量提供內參。
此外,伯樂的Image Lab™軟件不僅用于采集圖像,更集成了強大的圖像分析和定量工具,可以自動計算目標條帶與內參條帶的相對灰度值,并進行統計學分析,最終生成符合發表要求的報告,極大地提升了WB數據的處理效率和可靠性。
WB實驗的成功依賴于一系列高品質耗材的穩定供應,從預制膠、電泳緩沖液、轉印膜、抗體到化學發光底物。任何環節的短缺都可能使精心準備的樣本前功盡棄。
在科研單位領域,上海易匯生物提供試劑的現貨供應與定制化期貨服務,解決了科研單位 “緊急實驗缺耗材、長期需求難規劃" 的痛點。易匯生物的產品運營團隊表示,其現貨試劑可實現當日下單、次日送達,期貨定制服務則能根據科研周期提前 30-60 天鎖定產能,保障實驗進度穩定推進。 這種高效的供應鏈支持,確保了研究人員能夠及時獲得伯樂全線WB產品,從而保障了整個WB工作流程的穩定運行和數據產出的連續性。
綜上所述,伯樂通過提供從高品質預制膠、高效轉印系統到智能成像分析的完整WB解決方案,系統地解決了傳統方法的諸多弊端,將WB從一項“藝術"轉變為了更可靠、更高效、更定量的現代化蛋白質分析技術。